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層析冷柜廠家介紹凝膠過濾色譜的原理特點(diǎn)、特性參數(shù)含義

 更新時間:2015-10-19    點(diǎn)擊量:4103
 一、凝膠過濾色譜的原理及其特點(diǎn)
 
1、原理:凝膠過濾層析又稱凝膠排阻色譜,分子篩色譜法,凝膠過濾法等。利用凝膠過濾介質(zhì)為固定相,根據(jù)物料中溶質(zhì)相對分子質(zhì)量的差異的液相色譜法。
 
2、特點(diǎn):(1)操作方便,條件溫和,不會使物質(zhì)變性;(2)色譜介質(zhì)不需再生,可反復(fù)便用。(3)分離效率高,回收率較高。(4)廣泛應(yīng)用于生物大分子的初級分離,脫鹽等。(5)分辨率較低,需采用細(xì)長柱。(6)經(jīng)過凝膠過濾色譜后樣品被稀釋,上樣前需進(jìn)行濃縮。
 
二、凝膠過濾色譜的凝膠特性參數(shù)及其具體含義
 
(1)排阻極限(exclusionlimit)是指不能擴(kuò)散到凝膠基質(zhì)內(nèi)部中去的小分子的分子量。(SephadexG-50的排阻極限是30kDa)。
 
(2)分級范圍(Fractionationrange)它指出了當(dāng)溶液通過凝膠柱時,能夠?yàn)榻橘|(zhì)阻滯并且分離的溶質(zhì)分子量范圍(SephadexG-50,它的分級范圍為1500—30000)。
 
(3)吸水量(Waterregains)1g干凝膠所吸收的水分稱為吸水量(SephadexG-50的吸水量為5.0±0.3g)。溶脹率=吸水量×100%。
 
(4)凝膠粒徑凝膠顆粒一般為球形,其粒徑大小對分離度有重要影響(粒徑越小,其分離效率越高)。100-200目(50-150μm)。
 
(5)床體積(Bedvolume)表示1g干膠在溶脹后所具有的后體積(SephadexG-50的床體積為9—11ml/g干凝膠)。
 
(6)空隙體積(Voidvolume)表示填充柱中凝膠粒子周圍的總空間即V0(用平均分子量為2000kDa藍(lán)色葡聚糖測出)。

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